De onderdompelingsmethode van microscopische observatie omvat de introductie van een speciale vloeistof tussen de lens van het apparaat en het te bestuderen object. Het verbetert de helderheid en vergroot de reikwijdte van de beeldvergroting. Zo kan het object aanzienlijk worden ingezoomd en kunnen de kleinste elementen worden onderzocht zonder de apparatuur te veranderen. Dienovereenkomstig wordt de vloeistof onderdompeling genoemd. Het kan als een verscheidenheid aan composities dienen. De meest populaire is immersieolie. Overweeg de functies in meer detail.
Algemene informatie
De eerste immersieolie voor microscopie was ceder. Het had echter één belangrijk nadeel. In de loop van de tijd veranderden de eigenschappen ervan en het stond niet toe om de gewenste resultaten te verkrijgen. In de open lucht begon de vloeistof geleidelijk te condenseren (tot verharding). Dienovereenkomstig veranderde ook de brekingsindex. In de 20e eeuw begon men synthetische immersieolie te produceren. Deze vloeistof had niet het bovengenoemde tekort.
Onderdompelingsolienormen
Sleutelvloeistofparameters worden ingesteld in GOST 13739-78. Volgens de norm heeft immersieolie:
- brekingsindex nd=1.515±0.001;
- transmissie in het spectrale bereik van 500 tot 700 nm met een laagdikte van 1 mm - 95%, van 400 tot 480 nm - 92%;
De optimale temperatuur waarbij immersieolie kan worden gebruikt is 20 graden. Er zijn ook internationale normen. Volgens ISO 8036/1 is de brekingsindex 1,518 + 0,0005 en is de transmissie bij een laag van 10 mm voor het spectrale bereik van 500 tot 760 nm 95% en bij 400 nm 60%.
De aangegeven parameters komen overeen met niet-fluorescerende immersieolie. De norm ISO 8036-1/2 definieert de kenmerken van vloeistof voor luminescentie. De transmissie in het spectrale bereik van 500 tot 700 nm in een laag van 10 mm is 95%, van 365 tot 400 nm - 60%.
Moeilijkheden van parameterdiscrepanties
Een herkenbaar verschil in de bovenstaande normen kan leiden tot verslechtering van de prestaties van een bepaalde lens bij gebruik van een ongeschikte vloeistof. Resultaat:
- Contrast wordt verminderd door sferische aberratie.
- Het veld op het onderzoeksobject is gekleurd.
- Verlichting in het vlak van het bestudeerde object en in het gebied van zijn beeldvorming wordt ongelijkmatig.
- De foto wordt wazig.
Nuances
Optische microscopen hebben een bovengrens voor resolutieiets meer dan 100 keer. Bij dit vergrotingsniveau moet de verlichting van het bestudeerde object van hoge kwaliteit zijn. Anders wordt het resulterende beeld zo donker dat het onmogelijk is om het object te zien. Feit is dat de breking en verstrooiing van licht optreedt tussen het dekglas en het objectief. Immersieolie draagt bij aan een grotere opname. Als resultaat wordt het beeld duidelijker.
Kenmerken van lichtbreking
Hoe krijg je een duidelijk beeld? In verschillende media vindt de breking van licht op verschillende manieren plaats. De brekingshoeken van stralen in lucht en glas zijn bijvoorbeeld verschillend. In het eerste geval is de indicator 1,0, in de tweede - 1,5. Dit is het grootste probleem.
Het gebruik van olie stelt u in staat de brekingsindex te verminderen van de stralen die door het bestudeerde object gaan. Feit is dat de vloeistof dezelfde parameter heeft als het glas. Als resultaat wordt een homogeen medium gevormd tussen de slede en de lens, en het meeste licht dat door het object gaat, komt het instrument binnen. Dit resulteert in een helder beeld.
Technische punten
In de regel worden onderdompelingslensvaten gegraveerd met olie. Het element zelf wordt gebruikt wanneer een diafragma van 1,0 of meer nodig is. Dergelijke "immersie" lenzen worden gebruikt voor directe onderdompeling in een vloeistof. In dit opzicht zijn ze volledig verzegeld. Dit biedt een hoge bescherming tegen olieschade aan de lenzen.
Classificatie
Olie wordt in de praktijk gebruikttwee viscositeiten: hoog (type B) en laag (A). Vaak staat op de verpakking informatie over de brekingsindex. Ze produceren bijvoorbeeld immersieolie (100 ml), waarvan de brekingsindex 1,515 is. Vloeistoffen met een lage viscositeit worden in de luchtruimte aangebracht, en met een hoge viscositeit - samen met condensors.
Gebruiksvoorwaarden
Om een duidelijk beeld te krijgen van het bestudeerde object, moet je vrij eenvoudige aanbevelingen volgen:
- Zoek het te bestuderen object op de schuifregelaar in het midden van het veld met een kleine verhoging. Hiervoor wordt een lens met een lage vergroting gebruikt.
- Draai het torentje.
- Lens 100x in werkpositie brengen.
- Plaats een druppel olie op het glasplaatje, de tweede op de lens.
- Pas de werkafstand aan met fijne focus totdat het onderwerp duidelijk zichtbaar is.
Voorzichtigheid is geboden bij het werken. Het is belangrijk om te voorkomen dat er lucht tussen het dekglaasje en het objectief komt.
Onderdompelingsolie "Minimed"
Vloeistof wordt gebruikt bij het werken met achromatische en apochromatische lenzen van elk type apparaat, behalve lichtgevende. Volgens experts die deze immersieolie hebben gebruikt, heeft het verschillende nuttige eigenschappen. De vloeistof verbetert de zichtbaarheid van het object aanzienlijk, waardoor verblinding, lichtverlies en optische aberraties worden geminimaliseerd. Het gebruik van olie breidt het scala aan uitrustingsmogelijkheden aanzienlijk uit.
Reiniginguitrusting
Na het werken met immersieolie, is het noodzakelijk om het apparaat op orde te brengen. Reiniging moet worden gedaan voordat de lens droogt. Voor het verwijderen van olieresten wordt schoon lenspapier gebruikt. Een opgerolde plaat wordt gebruikt om alle glasoppervlakken te reinigen. Het lenspapier moet worden bevochtigd met een lensoplossing en alle resterende olie moet worden verwijderd.
Historische achtergrond
De eerste wetenschapper die het mechanisme van onderdompeling uitlegde, was Robert Hooke. In 1678 verscheen zijn boek Microscopium, waarin alle uitleg werd gegeven. In 1812 werd immersie voorgesteld als een manier om lensafwijkingen te corrigeren. De auteur van het idee was David Buster. Rond 1840 werden de eerste immersielenzen gemaakt. Hun schepper was D. B. Amici. Aanvankelijk gebruikten de onderzoekers anijsolie als immersievloeistof. De brekingsindex lag dicht bij die van glas.
