Selenietbouillon is een verrijkingsmedium met selectieve eigenschappen, ontworpen om pathogene bacteriën van het geslacht Salmonella (lat. Salmonella) te isoleren. Het is zeer effectief als het nodig is om deze specifieke ziekteverwekker te detecteren tussen andere vertegenwoordigers van de darmmicroflora. Het medium wordt gebruikt voor zowel klinische diagnostiek als sanitaire doeleinden bij het testen van levensmiddelen.
Algemene kenmerken
Selenietbouillon wordt bereid op basis van een poeder, dat een gehomogeniseerd mengsel is van verschillende componenten van de samenstelling. De kleur van het droge materiaal kan lichtgeel of crème zijn, afhankelijk van het type medium. Het poeder heeft vrij stromende eigenschappen.
Klaar selenietbouillon is een vloeibaar transparant medium met een lichtgele kleur. Deze massa wordt in containers gegoten waar gezaaid wordt voor verdere incubatie.
Er zijn drie hoofdsoorten selenietbouillon:
- pure medium - geschikt voor de isolatie van Salmonella uit zowel klinisch als sanitair materiaal;
- met toevoeging van mannitol (tweecomponentenbouillon) - ontworpen om alleen met klinisch materiaal te werken;
- cysteïne-selenietmedium - kan worden gebruikt om Salmonella te isoleren van pathologisch patiëntbiomateriaal (feces, urine, enz.).
Deze typen zijn iets anders qua compositie en actiekenmerken.
De belangrijkste taak van selenietbouillon is het bevorderen van de ophoping van salmonella en het remmen van de groei van begeleidende microflora. Hierdoor is het niet alleen mogelijk om de ziekteverwekker in het materiaal te detecteren, maar ook om deze vervolgens over te brengen naar agar. Het medium is ontwikkeld door Leifler, die voor het eerst de selectieve werking van seleniet tegen Salmonella ontdekte.
Compositie
Selenietbouillon bevat:
- caseïnehydrolysaat;
- lactose;
- natriumfosfaat;
- natriumhydroseleniet.
Seleniet-cysteïnemedium bevat naast deze componenten L-cysteïne en natriumwaterstoffosfaat. De samenstelling van mannitolbouillon verschilt doordat het in plaats van caseïnehydrolysaat peptische vertering van dierlijk weefsel bevat. In zo'n omgeving is er geen lactose, maar wel mannitol. Dit laatste fungeert als een fermenteerbaar substraat en zorgt voor de bufferende eigenschappen van de bouillon.
Alle componenten van het poeder, behalve natriumhydroseleniet, worden voorwaardelijk deel A genoemd en de selectieve stof wordt deel B genoemd.
Het werkingsprincipe en eigenschappen van de omgeving
Selenietbouillon werkt als opslagmediummet selectieve actie. Het selectieve effect wordt geleverd door de toxiciteit van seleniet, dat de groei van de meeste micro-organismen remt. Tegelijkertijd kunnen bacteriën van het geslacht Salmonella deze verbinding herstellen, waardoor het toxische effect op hun eigen cellen wordt geëlimineerd. Als resultaat van de reactie wordt echter een alkali gevormd, dat het nadelige effect van seleniet op de groei van geassocieerde microflora vermindert, en daarom wordt het noodzakelijk om de pH te stabiliseren. Deze functie wordt uitgevoerd door bacteriën die lactose fermenteren onder vorming van zuur. De buffering van het medium wordt verzorgd door fosfaat.
In tweecomponentenbouillon wordt de pH gestabiliseerd door mannitol. Het cysteïnemedium verbetert de selectieve werking tegen Salmonella. Zo'n bouillon is effectief voor het beheersen van de infectieuze achtergrond bij patiënten met een niet-acuut stadium van de ziekte of herstellende patiënten.
De manifestatie van groeikenmerken van referentiestammen in het medium kan 12-24 uur vanaf het begin van de incubatie worden waargenomen. In dit geval vormen Salmonella kleurloze kolonies.
Kookfuncties
De bereiding van het medium wordt in twee fasen uitgevoerd. Eerst wordt een oplossing gemaakt met een selectieve component met een snelheid van 4 gram natriumseleniet per liter gedestilleerd water. Voeg vervolgens 19 gram van het hoofdpoeder (onderdeel A) toe. De oplossing wordt grondig gemengd en verwarmd totdat de deeltjes volledig zijn opgelost, waarna het in steriele reageerbuizen wordt gegoten.
Bij het koken is het belangrijk om te volgentemperatuurregime, aangezien het medium onstabiel is voor oververhitting. Sterilisatie van de bouillon kan alleen in een waterbad worden uitgevoerd of met een stoomstraal. Autoclaveren van het medium is ten strengste verboden.
