De moderne geneeskunde heeft specifieke diagnostische methoden die het mogelijk maken om de etiologie van ziekten bij mensen vast te stellen op basis van de definitie van de ziekteverwekker, genetisch vreemde stoffen die de immuunrespons stimuleren, nucleïnezuren, evenals allergische en immuunveranderingen die ontstaan door zijn daden. Tegenwoordig wordt RIA veel gebruikt in de immunologie en virologie, dat wil zeggen radio-immunoassay, de doelen van het stellen, componenten, de cursus, waarvan de boekhouding, we zullen in dit artikel bespreken. Deze test kan antigenen detecteren als gevolg van hun interactie met antilichamen.
Definitie
RIA is een methode voor het diagnosticeren van biologisch actieve stoffen in vloeistoffen, die is gebaseerd op de reactie van antigenen met antilichamen bij gebruik van radionuclide-gelabelde analoge stoffen die speciale bindingssystemen hebben. Na hun interactieer wordt een immuuncomplex gevormd, dat wordt afgescheiden en de radioactiviteit ervan wordt bestudeerd. Het is bekend dat radio-immunoassay wordt uitgevoerd met behulp van standaard reagenskits.
Elk reagens kan de concentratie van één specifieke stof bepalen. De biologische vloeistof die van een persoon wordt afgenomen, wordt gemengd met een reagens, na de incubatieperiode worden de vrije en gebonden radioactieve stoffen gescheiden, vervolgens wordt radiometrie uitgevoerd en worden de resultaten berekend. Een isotoop van jodium wordt gebruikt om stoffen te labelen. Het is gemarkeerd en toegevoegd in een bepaalde hoeveelheid.
Toepassing
Radio-immuunanalyse heeft een brede toepassing in de geneeskunde en microbiologie. Het wordt gebruikt om hart- en vaatziekten, endocriene ziekten en andere lichaamssystemen te diagnosticeren. RIA's worden ook vaak gebruikt om de oorzaak van onvruchtbaarheid, de pathologie van de ontwikkeling van de foetus, te identificeren. In de oncologie wordt deze analyse uitgevoerd om de markers van neoplasmata te bepalen om de effectiviteit van de behandeling te kunnen volgen. In de immunologie wordt RIA gebruikt om de aanwezigheid van immunoglobulinen, enzymen, eiwitten, enzovoort in het bloed te bestuderen. Tegenwoordig kunt u met deze analyse de concentratie van verschillende hormonen detecteren tot een miljoenste van een gram. Zo wordt radio-immuunbloedanalyse veel gebruikt in de cardiologie, oncologie, endocrinologie, gynaecologie en virologie.
RIA-methoden
Het is gebruikelijk om verschillende analysemethoden te onderscheiden, afhankelijk van de aardreacties:
- De niet-competitieve methode wordt gekenmerkt door reactiecomponenten als standaard en detecteerbare antigenen, bufferoplossing, isotoop-gelabelde antilichamen, bepaalde antilichamen die aan het sorptiemiddel binden. Aan de te testen antilichamen wordt een antigeen toegevoegd. Na incubatie verschijnen antigeen-antilichaamcomplexen, het sorptiemiddel wordt gewassen, gelabelde antilichamen worden toegevoegd, die aan het antigeen in het complex binden. De radioactiviteit hangt af van de concentratie van het antigeen dat wordt getest.
- Concurrerende radio-immunoassay wordt aangedreven door antigeencompetitie. Hier zijn er componenten van de reactie als controle- en bepaalde antigenen, een bufferoplossing, bepaalde antilichamen die aan het sorptiemiddel binden, evenals een isotoop-gelabeld antigeen. De diagnose begint met de introductie van het antigeen dat wordt onderzocht. Op het sorptiemiddel wordt een antigeen-antilichaamcomplex gevormd. Vervolgens wordt het sorptiemiddel gewassen en wordt het gelabelde antigeen geïnjecteerd. Daarbij bindt het aan het antilichaam. Met behulp van tellers wordt de reactie en de hoeveelheid radioactiviteit gemeten. Het zal omgekeerd evenredig zijn met de hoeveelheid antigeen in het monster.
- De indirecte methode is de meest voorkomende. In dit geval heeft de radioimmunoassay van de reactiecomponent controle- en testserum, antigenen of antilichamen die aan het sorptiemiddel zijn gebonden, antilichamen die zijn gelabeld met isotopen, bufferoplossingen. Antilichamen of antigenen die worden gediagnosticeerd, reageren met antigenen of antilichamen die aan het sorptiemiddel zijn gebonden. Vervolgens wordt het incubeer verwijderd, worden gelabelde antilichamen geïnjecteerd, die binden aanantigeen-antilichaam complexen.
Analysemethodologie
Radioimmunoassay wordt dus uitgevoerd met speciale reagentia. De sets zijn standaard, dus eventuele fouten of overtredingen zijn niet toegestaan. Diagnostische resultaten zijn betrouwbaar. De analyse wordt 's ochtends uitgevoerd, hiervoor nemen ze veneus bloed van een persoon. In het laboratorium wordt serum van het bloed gescheiden, dat zal worden gebruikt voor RIA. Dit serum wordt gemengd met reagentia. Het resulterende mengsel wordt bij een bepaalde temperatuur in een thermostaat geïncubeerd.
Vrije en gebonden isotopen worden gescheiden in het resulterende mengsel. Daarna wordt het ontvangen materiaal onderzocht en worden de resultaten berekend. Het radioimmunoassay-mechanisme heeft verschillende opties. De hierboven beschreven techniek is een RIA in de vloeibare fase, aangezien alle componenten zich in vloeibare toestand bevinden. Er is RIA en vaste fase, waarbij antilichamen in een drager worden geplaatst die niet in vloeistof oplost.
Beschikbaarheid van diagnostiek
Het gebruik van deze diagnostische methode in de geneeskunde wordt elk jaar steeds populairder. Onlangs is radio-immunoassay een standaard diagnostische methode geworden die door een arts kan worden voorgeschreven bij het stellen van een definitieve diagnose. Lange tijd werd dit type analyse alleen in laboratoria uitgevoerd, tegenwoordig is het een veelgebruikte onderzoeksmethode geworden. Maar RIA vereist het gebruik van dure apparatuur (gammatellers) en reagenskits hebben een korte levensduur. Dit alles is het belangrijkste nadeel van een dergelijke analyse, die bepalend is voor dedure kosten.
Bovendien is RIA onlangs begonnen met het vervangen van modernere onderzoeksmethoden die geen interactie met isotopen vereisen. Deze omvatten enzymimmunoassay. Daarom is RIA in veel klinieken wenselijk. Het wordt al lang gebruikt in grote steden en diagnostische centra, maar in gewone ziekenhuizen in kleine steden wordt deze analyse praktisch niet gebruikt vanwege de hoge kosten.
Waardigheid van RIA
Radioimmunoassay heeft veel voordelen. Het is vrij specifiek en heeft een hoge gevoeligheid, waardoor het mogelijk is om de aanwezigheid van biologisch actieve stoffen in ongelooflijk kleine hoeveelheden te bepalen. Deze analyse wordt heel eenvoudig uitgevoerd, een persoon hoeft alleen veneus bloed te doneren. De testresultaten zijn 100% nauwkeurig en de volgende dag klaar. RIA kan ook eenvoudig worden geautomatiseerd. Met deze analyse kunt u dus eiwitten identificeren die afvalproducten zijn van besmettelijke bacteriën, wat wijst op de aanwezigheid van een infectie in het lichaam.
Diagnose in de virologie
De meest veelbelovende RIA is voor virologie, omdat je hiermee snel virale pathogenen kunt identificeren. Dit komt door het feit dat de afgelopen jaren de incidentie van verschillende infecties toeneemt, die zich met hoge snelheid verspreiden en sterfte onder mensen veroorzaken. Dit geldt met name voor landen die geen highsociale en economische ontwikkeling (de landen van het Verre Oosten), is radio-immunoassay hier gewoon onmisbaar. Microbiologie gebruikt deze diagnostische methode ook om infectieziekten veroorzaakt door pathogene bacteriën op te sporen. RIA wordt bijvoorbeeld veel gebruikt om buiktyfus op te sporen. In de eerste dagen van de ziekte, vóór de benoeming van de behandeling, is het noodzakelijk om ontlasting en braaksel te onderzoeken. De diagnostische resultaten zullen echter na een lange tijd worden verkregen. Hier komt RIA te hulp, de analyse stelt u in staat om de veroorzaker van de ziekte in korte tijd te identificeren. Een persoon doneert bloed, de volgende dag zijn de resultaten van het onderzoek klaar. Deze analyse helpt bij het maken van een nauwkeurige diagnose.
Resultaten
Radioimmunoassay is momenteel een van de meest gevoelige diagnostische methoden. Het wordt gebruikt om elke stof te analyseren waartegen antilichamen kunnen worden verkregen. Deze methode maakt het mogelijk om veel monsters te maken in het kleinste volume van de onderzochte vloeistof en om de resultaten in de kortst mogelijke tijd vast te leggen, omdat het volledig geautomatiseerd kan worden. Deze analyse is in de jaren vijftig ontwikkeld door Solomon Burson. Dertig jaar later werd het wijdverbreid. Tot op heden is er geen honderd procent alternatief voor RIA, omdat de analyse een hoge gevoeligheid heeft. RIA wordt gebruikt in verschillende takken van de geneeskunde, maar ook in de microbiologie en virologie.
Eindelijk
Het gebruik van de methode in de virologie is tegenwoordig erg relevant, want het geefthet vermogen om de verspreiding van infecties te onderzoeken, een nauwkeurige diagnose te stellen en een specifieke behandeling voor te schrijven. Dit probleem is vooral relevant voor landen met een laag niveau van economie en sociale ontwikkeling. Met deze analyse kunt u ook de hoeveelheid hormonen en enzymen in het menselijk lichaam detecteren. Om betrouwbare resultaten te verkrijgen, hoeft de onderzoeker alleen bloed te doneren voor analyse. De geneeskunde staat niet stil, samen met radio-immunoassay verschijnen nieuwe onderzoeksmethoden, maar RIA blijft een van de leiders in medische diagnostiek.
