De verscheidenheid aan bacteriële infecties vereist een duidelijke identificatie van de ziekteverwekker en de definitie van zijn soort. Om het type micro-organisme te bepalen, worden microbiologen geholpen door de kleureigenschappen ervan - de gevoeligheid van de microbe voor kleuring met verschillende kleurstoffen. Met deze methode kunt u de morfologie van de ziekteverwekker onderzoeken. De kleureigenschappen van bacteriën zijn van groot belang voor praktisch en theoretisch onderzoek op het gebied van microbiologie.
Microbieel onderzoek
In de bacteriologie zijn er veel methoden om micro-organismen te kleuren. Ze zijn allemaal gebaseerd op de kleureigenschappen van bacteriën. Met kleuring kunt u hun vorm, structuur, grootte en relatieve positie bepalen. Dit maakt het mogelijk de problemen op te lossen van het systematiseren van de soorten micro-organismen van de algemene biologie en de vergelijkende microbiologie.
Waarom ze schilderen
Bacteriën zijn praktischtransparante organismen, en zonder het gebruik van kleuring, zijn ze slecht zichtbaar voor conventionele microscopie. Je kunt speciale soorten microscopie (fasecontrast, donkerveld) gebruiken om objecten te bestuderen, maar de gemakkelijkste manier is om te kleuren, waarna de bacteriën zichtbaar worden in een conventionele lichtmicroscoop.
Monstervoorbereiding
Ongeacht de gebruikte kleurtechniek, zijn er uniforme regels voor het voorbereiden van het bestudeerde object. De volgende fasen zijn verplicht:
- Steriele instrumenten maken een uitstrijkje op een glasplaatje.
- Het monster wordt gedroogd. Dit gebeurt op kamertemperatuur of met behulp van droogkasten.
- Gevolgd door de fixatiefase - micro-organismen worden met speciale verbindingen aan het glas gehecht.
- Goede kleuring - het monster wordt gedurende een bepaalde tijd met kleurstof bedekt, waarna het wordt afgewassen.
- Laatste droging - het monster wordt opnieuw gedroogd.
De meest voorkomende kleurstoffen
De meest gebruikte kleurstoffen zijn gebaseerd op aniline met verschillende zuurwaarden (pH). De meeste kleurstoffen zijn poeders die zijn verdund in alcohol.
Kleurstoffen waarin kationen de kleurstoffen zijn, worden basisch genoemd (pH hoger dan 7). Ze kunnen worden gebruikt om micro-organismen te kleuren in de kleuren rood (magenta, safranine), violet (methylviolet, thionine), blauw (methyleenblauw), groen (malachietgroen), bruin (chrysoïdine) en zwart (induline).
Kleurstoffen, waarin de kleurstoffen anionen zijn, worden zuur genoemd (pH lager dan 7). Ze zullen het monster rood (eosine), geel (picrine) of zwart (nigrosine) kleuren.
Er is een groep neutrale kleurstoffen (bijvoorbeeld rhodamine B), waarbij zowel kationen als anionen als kleurstoffen werken.
Cultuur dood of levend
De kleuringsmethoden zijn verdeeld in twee groepen, afhankelijk van de levensvorm van het testexemplaar.
- Vitale (levenslange) kleuring. Deze methode voor het bestuderen van de eigenschappen van micro-organismen wordt gebruikt bij de studie van levende weefsels, wat het mogelijk maakt om de vitale processen van microben te observeren. Voor deze kleuring worden kleurstoffen met een lage toxiciteit en een hoog doordringend vermogen gebruikt.
- Post-vitale kleuring. Dit is het kleuren van dode of gedode micro-organismen. Dankzij de kleureigenschappen van bacteriën bepalen microbiologen hun structuur. Het is deze kleuring die het meest wordt gebruikt.
Grampositief en Gramnegatief
Het zijn deze kenmerken van bacteriën die terug te vinden zijn in de instructies van verschillende medicijnen. Deze methode voor het bestuderen van de kleureigenschappen van bacteriën is gebaseerd op het gebruik van gentiaanvioletkleurstof en jodiumfixatie. Dit is de techniek van Hans Christian Gram, een Deense arts die het in 1884 voorstelde. Als gevolg van deze kleuring worden bacteriën in twee groepen verdeeld:
- Gram (+) - blauw worden(stafylokokken en streptokokken).
- Gram (-) - vlek roze tot rood (enterobacteriën, salmonella, E. coli).
Verschillende kleurresultaten zijn te wijten aan verschillende kleureigenschappen van bacteriewanden. De Gram-kleuringsmethode is nog steeds de belangrijkste bij de diagnose van sommige infectieziekten.
Andere kleurtechnieken
Laten we nog een paar methoden karakteriseren die veel worden gebruikt in de bacteriologie.
- Ziehl-Nelson-methode - bepa alt de zuurresistentie van bacteriën. Het identificeert de veroorzakers van tuberculose en mycobacteriose.
- Romanovsky-Giemsa-techniek - kleurt acidofiele (azijnzuur en melkzuur) bacteriën rood en basofiele (spirocheten en protozoa) blauw.
- Morozov's techniek - kleurt bacteriën bruin en maakt hun flagellen zichtbaar.
Sporen zijn te zien
Tsiel's fuchcin-kleuring laat je bacteriesporen zien. Met een roze kleur na kleuring, zijn ze duidelijk zichtbaar tegen de achtergrond van blauwe bacteriën. Deze methode is ook een instrument van bacteriologie en is van groot praktisch belang.
