De term "microscopie" heeft Griekse wortels. In vertaling betekent het de studie van objecten met behulp van zeer nauwkeurige instrumenten. De laatste tijd zijn fluorescentie- en elektronenmicroscopie steeds populairder geworden.
Resolutie
Daaronder begrijpen ze in de regel de minimale afstand waarop duidelijk te onderscheiden objecten kunnen worden gelokaliseerd. De mate van penetratie in de microscopische wereld, het vermogen om de grootte van het onderzochte element te overwegen, hangt af van de resolutie van de apparatuur. Bij hoge vergroting kunnen de grenzen van objecten samenvloeien. Dienovereenkomstig zijn er bepaalde grenzen waarbuiten de benadering van elementen zinloos is.
Luminescentiemicroscopiemethode: mechanisme
Wanneer de door een stof geabsorbeerde energie wordt omgezet in zichtbare straling, ontstaat er een gloed. Het wordt luminescentie genoemd. Dit fenomeen is te wijten aan het feit dat sommige stoffen, onder invloed van licht, stralen beginnen uit te zenden met een andere (meestal grote) golflengte. Daarnaast kunnen sommige objecten die bij normale verlichting een bepaaldekleur, onder invloed van ultraviolet veranderen hun kleur.
Specificaties
Een object dat niet zichtbaar is onder ultraviolet licht, kan een heldere glans uitstralen als het wordt behandeld met een speciale stof. Daarin gloeien de elementen in verschillende kleuren in het donker. De sterkte van de straling is anders, maar in de regel klein. In dit opzicht is fluorescentiemicroscopie effectief in een verduisterde kamer. Bij dit type onderzoek wordt het object bekeken in het licht dat het zelf uitstra alt. De chemische samenstelling van weefsels, cellen zal de kwaliteit van het onderzoek beïnvloeden. Fluorescentiemicroscopie wordt tot op zekere hoogte als een histochemisch onderzoek beschouwd.
Classificatie
Fluorescentiemicroscopie kan primair of secundair zijn. In het laatste geval wordt het object bewerkt met speciale verbindingen die een gloed geven. Primaire fluorescentiemicroscopie is gebaseerd op het eigen vermogen van het element om licht uit te stralen.
Apparatuur
Fluorescentiemicroscopie wordt uitgevoerd met behulp van verschillende apparaten. Hun belangrijkste element is de illuminator. Het is uitgerust met een UV-lamp. Daarnaast maken de toestellen gebruik van een set filters. Op sommige apparaten zijn er nogal wat verschillende configuraties. Afhankelijk van welke kleur wordt gebruikt om luminescentie op te wekken - ultraviolet of blauw, wordt een geschikt filter geplaatst tussen de lichtbron en het te bestuderen object. Aangezien de gloed van een microscopisch element energetisch zwakker is dan het opwindende licht, zal het slechts onder één voorwaarde worden vastgelegd. Overtollige stralen van de bron moeten worden afgesneden door een geelgroen filter. Deze bevindt zich op het oculair van het apparaat. Het meest uitgesproken effect van luminescentie is wanneer het filter de stralen van de lichtbron volledig afsnijdt.
Waaruit bestaat een zichtbaar-lichtinstallatie? Het bevat een felle lichtbron en een biologische microscoop. Tussen de spiegel van het apparaat en de lamp is een blauw-violet filter geplaatst. Het kan FS-1, UFS-3 enzovoort zijn. Het gele filter wordt op het oculair van de microscoop geplaatst. Met hun hulp v alt blauw-violet licht op het object. Het wekt luminescentie op. Maar dit licht kan interfereren met het zien van de gloed. Daarom wordt het op weg naar het oog afgesneden door een geel filter. Verlichting wordt ingesteld volgens de Koehler-methode, met één uitzondering. Het condensormembraan moet volledig geopend zijn. Bij het onderzoeken is het belangrijk om een niet-fluorescerende immersieolie te gebruiken. Om de eigen glans te verminderen, wordt er nitrobenzeen aan toegevoegd (2-10 druppels / 1 g).
Luminescentiemicroscopie: toepassingen in de microbiologie
De voordelen van dit type onderzoek zijn:
- Kleurbeeldvorming.
- Zelfstralende elementen met hoog contrast op een zwarte achtergrond.
- Detectie en lokalisatie van bepaalde soorten virussen en microben.
- Het vermogen om transparant en ondoorzichtig te studerenlevende organismen.
- Onderzoek van levensprocessen in hun dynamiek.
Het moet ook gezegd worden dat luminescentiemicroscopie bijdraagt aan de ontwikkeling van de beste methoden van histo- en cytochemie, express diagnostiek.