Onderzoek naar bacteriën vereist nauwgezet werk met tal van apparatuur en instrumenten. Om micro-organismen in laboratoriumomstandigheden zo snel mogelijk te laten vermenigvuldigen en om de normale vitale activiteit te kunnen behouden, worden speciale voedingsmedia gebruikt. Hun samenstelling en biofysische omstandigheden zijn geschikt voor de actieve groei van een bacteriecultuur.
Voedende media. Microbiologie en andere toepassingen
Bacteriële kolonies worden in het laboratorium gekweekt op petrischalen gevuld met geleiachtige of halfvloeibare inhoud. Dit zijn voedingsmedia waarvan de samenstelling en eigenschappen zo dicht mogelijk bij de natuurlijke liggen voor een hoogwaardige gewasgroei.
Dergelijke omgevingen worden gebruikt in microbiologisch onderzoek en in medische diagnostische laboratoria. Deze laatste werken meestal met uitstrijkjes van pathogene of opportunistische bacteriën, waarvan de systematische positie direct in de inrichting wordt bepaald.
Natuurlijk en synthetischwoensdag
De basisregel van het werken met bacteriën is de juiste keuze van de voedingsbodem. Het moet aan tal van criteria voldoen, waaronder het geh alte aan micro- en macro-elementen, enzymen, een constante zuurgraad, osmotische druk en zelfs het percentage zuurstof in de lucht.
Voedzame media worden ingedeeld in twee grote groepen:
- Natuurlijke omgevingen. Dergelijke mengsels worden bereid uit natuurlijke ingrediënten. Dit kan rivierwater zijn, plantendelen, mest, groenten, plantaardig en dierlijk weefsel, gist, enz. Dergelijke omgevingen worden gekenmerkt door een hoog geh alte aan natuurlijke chemicaliën, waarvan de verscheidenheid de groei van bacteriecultuur bevordert. Ondanks deze duidelijke voordelen, laten natuurlijke omgevingen geen gespecialiseerd onderzoek met specifieke bacteriestammen toe.
- Synthetische media. Ze verschillen doordat hun chemische samenstelling bekend is in exacte verhoudingen van alle bestanddelen. Dergelijke media worden geprepareerd voor een specifieke bacteriecultuur, waarvan het metabolisme vooraf aan de onderzoeker bekend is. Om deze reden is het eigenlijk mogelijk om een dergelijke synthetische omgeving voor de ontwikkeling van micro-organismen voor te bereiden. Ze worden gebruikt om de vitale activiteit van bacteriën te analyseren. Je kunt er bijvoorbeeld achter komen welke stoffen ze in het milieu afgeven en hoeveel. Micro-organismen zullen ook groeien in natuurlijke media, maar het is onmogelijk om kwantitatieve veranderingen in de samenstelling te volgen vanwege onwetendheid over de aanvankelijke verhoudingen van stoffen.
Differentiële-diagnostische omgevingen
Bij het werken met bacteriën kunnen niet alleen gewone voedingsmedia worden gebruikt. Microbiologie is een omvangrijke wetenschap en daarom is het bij het uitvoeren van een onderzoek soms nodig om om de een of andere reden een selectie van micro-organismen te maken. Het gebruik van differentiële diagnostische media in het laboratorium maakt het mogelijk om de gewenste bacteriekolonies op een petrischaal te selecteren op basis van het biochemische teken van hun vitale activiteit.
De samenstelling van dergelijke omgevingen bevat altijd de volgende componenten:
1. Voedingsstoffen voor celgroei.
2. Geanalyseerd substraat (stof).
3. Een indicator die een karakteristieke kleur geeft wanneer een bepaalde reactie optreedt.
Een voorbeeld is het differentiële diagnostische voedingsmedium "Endo". Het wordt gebruikt om kolonies bacteriën te selecteren die lactose kunnen afbreken. Aanvankelijk heeft dit medium een roze kleur. Als een kolonie micro-organismen niet in staat is om lactose af te breken, krijgt ze de gebruikelijke witte kleur. Als de bacteriën dit substraat kunnen afbreken, krijgen ze een karakteristieke felrode kleur.
Keuze woensdagen
Diagnostische laboratoria werken vaak met wattenstaafjes die veel verschillende soorten bacteriën bevatten. Het is duidelijk dat voor kwaliteitswerk het noodzakelijk is om op de een of andere manier de kolonies te selecteren die we nodig hebben van tientallen buitenstaanders. Dit is waar een bacteriegroeimedium kan helpen, dat ideaal is samengesteld om slechts één type micro-organisme te ondersteunen.
Bijvoorbeeld,een dergelijke electieve omgeving is alleen geschikt voor de reproductie van Escherichia coli. Als we dan veel bacteriën op een petrischaal zaaien, zien we alleen kolonies van dezelfde Escherichia coli en niet meer. Voordat met het werk wordt begonnen, is het noodzakelijk om het metabolisme van de bestudeerde bacterie goed te kennen om deze met succes te kunnen selecteren uit een mengsel van andere soorten.
Vaste, halfvaste en vloeibare kweekmedia
Bacteriën kunnen niet alleen op vaste substraten worden gekweekt. Voedingsmedia verschillen van elkaar in hun aggregatietoestand, die afhangt van de samenstelling tijdens de fabricage. Aanvankelijk hebben ze allemaal een vloeibare consistentie en wanneer gelatine of agar in een bepaald percentage wordt toegevoegd, stolt het mengsel.
Vloeibare kweekmedia worden meestal gevonden in reageerbuizen. Als het nodig is om onder dergelijke omstandigheden bacteriën te kweken, voeg dan een oplossing met een kweekmonster toe en wacht 2-3 dagen. Het resultaat kan variëren: er vormt zich een neerslag, er verschijnt een film, er drijven kleine vlokken of er vormt zich een troebele oplossing.
Dicht kweekmedium wordt vaak gebruikt in microbiologisch onderzoek om de eigenschappen van bacteriekolonies te bestuderen. Dergelijke media zijn altijd transparant of doorschijnend, zodat het mogelijk is om de kleur en vorm van de kweek van micro-organismen correct te bepalen.
Mediavoorbereiding
Substraten zoals vlees-pepton mengsels op basis van bouillon, gelatine of agar zijn heel gemakkelijk te bereiden. Als u van een vast of halfvloeibaar substraat een vloeistof moet makenvoeg respectievelijk 2-3% of 0, 2-0, 3% gelatine of agar toe. Ze spelen een grote rol bij het uitharden van het mengsel, maar zijn geen bron van voedingsstoffen. Zo worden voedingsmedia verkregen die geschikt zijn voor de groei van een bacteriecultuur.
