Dit artikel zal gewijd zijn aan het fenomeen van de neerslagreactie. Hier zullen we kijken naar de kenmerken van de formulering van dit fenomeen, het fenomeen van diffusie, algemene kenmerken, rol in het menselijk leven en nog veel meer.
Inleiding tot het fenomeen
Precipitatie is een fenomeen van een serologisch type, waarbij oplosbare antigenen interageren met antilichamen en als resultaat precipitatie wordt waargenomen - een precipitaat.
Het algemene kenmerk van de precipitatiereactie is een vorm van gecoördineerde invloed van antigeen en antilichaam. Dit soort interacties maakt het mogelijk om de aanwezigheid van onbekende antigenen in de teststof te bepalen door bekende antilichamen en antigenen toe te voegen. Het precipitatieproces zonder de aanwezigheid van zouten zal slechter verlopen en het beste optimum ligt binnen het bereik van 7,0-7,4 pH.
Constituenten van een reactie
Er zijn drie hoofdelementen in de componenten van de precipitatiereactie:
- Een antigeen met een moleculaire aard. Het is in de staat van het fijne type, met andere woorden, het isoplosbaar. Een dergelijk antigeen wordt ook een precipitogeen genoemd, wat een lysaat of weefselextract is, enz. Een precipitogeen heeft een kenmerkend verschil met een agglutinogeen, dat ligt in de grootte van de deeltjes waaruit het bestaat. Agglutinogeen heeft een inherente celgrootte en precipitogenen zijn evenredig met de grootte van het molecuul. De antigeenoplossing wordt gekenmerkt door transparantie.
- Een antilichaam gevonden in menselijk bloedserum, evenals in immuun diagnostisch serum, dat de bestudeerde antilichamen bevat.
- Elektrolyten zijn natriumchlorideoplossingen die isotoon zijn.
Precipitogeenproductie
Het opzetten van een precipitatiereactie is onmogelijk zonder een precipitogeen, dat wordt verkregen door materialen te malen en er eiwitantigenen uit te extraheren. Extractie vindt plaats door koken of andere methoden.
Lysaten, evenals weefsel- en orgaanextracten, bloedserum, verschillende soorten filtraten op basis van microbiële bouillonculturen, evenals zoutextract van micro-organismen en autolysaatstoffen, zijn een opvallende voorbeeld van precipitogenen
Opstellen bij neerslag
Laten we nu eens kijken naar de methode voor het opzetten van de precipitatiereactie.
Er wordt een ringprecipitatiereactie uitgevoerd, die plaatsvindt in speciaal geprepareerde reageerbuizen. Serum wordt in de holte van de schaal gebracht en met behulp van een pipettuit over de muur gegoten. Vervolgens wordt de juiste hoeveelheid neerslag er voorzichtig bovenop gelegd en vervolgens wordt de buis vanuit een horizontale naar een verticale positie gebracht. Het opzetten en in acht nemen van de neerslagreactie is een zeer nauwgezette operatie. Het resultaat wordt geregistreerd na het verschijnen van een witte ring op de grens tussen het antigeen en het antilichaam. Als de reagerende elementen van de reactie met elkaar overeenkomen, binden ze, maar dit wordt merkbaar na een lange periode van interactie.
De precipitatiereactie wordt ook uitgevoerd in een petrischaal of op een glas dia, waar agargel wordt overgebracht, en breng het in een kleine laag aan. Nadat het in de gel is uitgehard, wordt een klein aantal putjes uitgesneden waarin antigenen en antilichamen worden geplaatst. Er zijn twee manieren om deze actie uit te voeren: de methode van radiale immunodiffusie en dubbele immunodiffusie.
Algemene informatie
De mechanica van het neerslagwerk is vergelijkbaar met het agglutinatieapparaat. Onder invloed van serum van het immuuntype vermindert het antigeen, dat al in de reactie is gekomen, zijn mate van dispersiteit. Een belangrijke voorwaarde is de transparantie van zowel het serum als het antigeen.
Je kunt de registratie van de reactie verbeteren door antigenen op antistoffen te superponeren. Dientengevolge kan het verschijnen van precipitaten in de vorm van een ring worden waargenomen. Dit fenomeen wordt ringprecipitatie genoemd en wordt uitgevoerd in speciale buizen met een diameter van 2,5 tot 3,5 mm. Een van de meest voorkomende voorbeelden van een neerslagreactie is de diagnose van miltvuur.
Precipitatie maakt het mogelijk om de mate van toxigeniciteit van een difteriecultuur in agar te bepalen.
Tijdens de betreffende reactieprecipitatie van antigene complexen en antilichamen vindt plaats. Neerslag is een immunologisch fenomeen waarmee u de hoeveelheid antistoffen in het bloedserum van een zieke of gevaccineerde persoon en dieren kunt bepalen.
Gevolg van titratie
Het is belangrijk om te weten dat de gegevens die zijn verkregen door titratie van de bovenstaande methode niet kwantificeerbaar zijn. Om een kwantitatieve beoordeling van het aanwezige aantal antilichamen te maken en te analyseren, werd een speciale reactietechniek ontwikkeld door M. Heidelberger en E. Kabat, die gebaseerd is op het zoeken en identificeren van de equivalentiezone. Het mengen van het leeftijdsgetal van antigenen met een constant volume antiserum leidt tot een toename van het aanvankelijk gevormde precipitaat, en vervolgens neemt het weer af door een toename van het vermogen om de antigeencomplexen op te lossen. Door de hoeveelheid antilichamen in de supernatanten in elke buis te bepalen, kunt u zien dat een bepaald aantal schalen met antilichamen vloeistof zal missen. Hier zal, in vergelijking met andere reageerbuizen, het grootste neerslag gevormd worden. Hierdoor en door aftrekking van het antigene eiwitprecipitaat van de totale waarde van eiwitten, is het mogelijk om de exacte waarde te verkrijgen van de antilichamen die aanwezig zijn in het volume van het specifieke serum dat wordt bestudeerd. Verder wordt de hoeveelheid eiwitmoleculen van het neerslag bepaald door de hoeveelheid stikstof of door gebruik te maken van colorimetrische methoden.
Evaluatie van waarden
Bij het schatten van precipitatiewaarden in diagnostische methodologie moet rekening worden gehouden met de mogelijkheid van de aanwezigheid in het immuunserum van een antilichaam dat niet de eigenschap precipitine heeft, waaruit volgt dat het precipitaat zelf mogelijk niet aanwezig is gevormd na reactie met antigenen. De lijst van dergelijke moleculen omvat onvolledige antilichamen en sommige soorten uit de groep van gamma-A-globulinen.
De precipitatiereactie in laboratoriumomstandigheden vindt zijn toepassing in verschillende soorten modificaties. De thermoprecipitatiereactie wordt bijvoorbeeld gebruikt om bacteriële antigenen van botulisme, miltvuur, enz., Die geen thermische denaturatie ondergaan, te detecteren. In tegenstelling tot ringprecipitatie, gebruikt dit type reactie filtraten van het materiaal in kwestie in een gekookte toestand.
Analyse van de precipitatiereactie in een complex mengsel laat niet toe om de eigenschappen van individuele elementen van het mengsel te karakteriseren. In dergelijke gevallen neemt een persoon zijn toevlucht tot de methode van precipitatie in agar en gebruikt hij ook immuno-elektroferese.
Diffuse neerslag
In dit onderzoeksgebied is er het concept van een diffuse neerslagreactie (RPD). Het is gebaseerd op het vermogen om antilichamen en oplosbare antigenen in de gel te verspreiden. Diffusie is het vermogen van een molecuul van een bepaalde stof om door te dringen in de moleculen van een andere, wat wordt veroorzaakt door thermische beweging.
Gel is een systeem van het gedispergeerde type waarin de vloeibare fase gelijkmatig wordt verdeeld over de vaste fase. Meestal wordt voor een dergelijke reactie agargel gebruiktomstandigheden waaronder de moleculen ten opzichte van elkaar kunnen diffunderen, zal hun ontmoeting gepaard gaan met de vorming van een antigeen + antilichaamcomplex. Een dergelijk neoplasma kan diffunderen, omdat het in de gel zelf zit, en het zal neerslaan in de vorm van een strip die met het blote oog kan worden gedetecteerd. Als het antigeen en antilichaam homoloog zijn, zal er geen band worden gevormd.
Het creëren van de omstandigheden waaronder diffusie zal plaatsvinden in de agarlaag omvat het gieten van de componenten, maar het totale aantal putjes en hun relatieve positie wordt bepaald door het type taak dat nodig is beslissen. RPD geeft een persoon de mogelijkheid om onbekende geïsoleerde virussen te detecteren en te identificeren door te testen met bekende antilichaamsera.
Toepassing
Neerslag wordt veel gebruikt, niet alleen bij de diagnose van ziekten, maar vindt ook zijn toepassing bij forensisch medisch onderzoek. Een analyse waarbij het mogelijk is om de soort bloed, een deel van een orgaan of weefsel te bepalen die wordt aangetroffen op een misdaadwapen dat geen gebruik maakt van de neerslagreactie, is moeilijk voorstelbaar. Tijdens dit proces worden precipiterende sera gebruikt, die worden verkregen door verschillende dieren en vogels te immuniseren. Het is belangrijk dat het serumtiterniveau niet lager is dan 1:10000 en ook voldoende specificiteit heeft. Van de gedetecteerde plek van bloed of zijn korst, wordt een extract gemaakt voor fysiek. oplossing, die verder zal worden blootgesteld aanneerslaand serum. Volgens deze reactie is het mogelijk om de soorten weefsel- en orgaaneiwitten van zowel mens als dier vast te stellen. Het verkrijgen van troebele extracten dwingt iemand zijn toevlucht te nemen tot neerslag op agar.
Conclusies
Door de gelezen informatie te analyseren, kunnen we concluderen dat neerslagreacties uiterst belangrijk zijn voor een persoon, omdat ze de diagnose van verschillende antigenen met behulp van antilichamen mogelijk maken. Dit fenomeen wordt ook veel gebruikt bij forensisch medisch onderzoek en stelt u in staat om het type van bloed, weefsel of orgaan in relatie tot een bepaald onderwerp. Er zijn verschillende soorten en methoden van neerslag, die worden gebruikt in overeenstemming met de opkomende behoeften van het probleem dat moet worden opgelost.
